埃博拉病毒(EBOV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)準備試劑與收集血樣：

雙重核酸試劑盒（熒光PCR法）　1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

性能：

1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：檢測濃度小于0.1 U/mL。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

4. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6個月

盤羊皮膚細胞；ASHS3

山羊腎上皮樣細胞；DG-K1

山羊皮膚成纖維樣細胞；DG-S1

豬源細胞

豬腎細胞；LLC-PK1

豬腎細胞；PK(15)

豬腎傳代細胞；IBRS-2

豬腎細胞；PK（15）

豬睪丸細胞；ST

小型豬腎細胞；MPK

小鼠髖動脈內(nèi)皮細胞；PIEC

豬胚胎睪丸傳代細胞；ST

豬腎傳代細胞；IBRS－2

豬腎細胞；PK-15

豬靜脈血管內(nèi)皮細胞；ZYM-SVEC01

豬小腸上皮細胞；ZYM-DIEC02

小耳豬腎細胞；SEPfk

小耳豬肺細胞；SEP-L1

小耳豬肺細胞；SEP-L2

家豬皮膚細胞；SSC-S1

小香豬皮膚細胞；SSC-S2

長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞；201184

貂源細胞

鼬肺上皮細胞；MV-1-Lu

水貂肺上皮細胞；Mv.1.Lu(NBL-7)

水貂肺上皮細胞；Mv.1.Lu(NBL-7)

牛源細胞

新生牛眼晶體上皮細胞；NBLE

新生牛眼Tenon＇s囊成纖維細胞；NBTF